整体制片法

指不经过切片,而将 整个微小的或透明的动植物体或器官 封藏起来,制成整体装片的方法。此法 制片操作简便,所需仪器药品简单,能 够显示出动植物体或小型器官的全 貌。适合于封藏单细胞藻类、菌类、蕨 类的原叶体和孢子囊、高等植物的表 皮、花粉粒、植物幼胚,原生动物、虫 卵、水螅、昆虫和早期胚胎等。整体制 片法根据所用的脱水剂、透明剂和封 藏剂不同而分为暂时制片法、半永久 制片法和永久性制片法。
运用整体制片法制片的具体方法 和要求是:①暂时装片的制作。将少许 材料放在载玻片上,加上一滴水,盖上 盖玻片即成暂时整体装片标本。若需 较长时间保存,可用甘油代替水将材 料封藏起来。其做法是:先将少量材料 置于载玻片上,加一、二滴10%甘油 后盖上盖玻片,当其中的水分蒸发一 部分后,在盖玻片的一侧,用滴管再加 一滴甘油,如此反复进行,直到水分蒸 发,完全变为甘油为止。操作时必须注 意,蒸发速度不可太快,加入的甘油浓 度要逐渐增加,以避免材料收缩。制好 的片子要平置保存。②半永久性装片 的制作。其封藏剂用甘油胶冻。先将1 份明胶溶解于6份35℃温水中,然后 加入7份甘油,再每100毫升加石炭 酸1克,完全溶解时,用粗滤纸过滤到 培养皿中,冻结后划成小块。将制片材 料经固定、冲洗,在甘油中脱水后备 用。取一小块甘油胶冻,放在清洁干燥 的载玻片上,加热至溶解,将准备好的 材料用吸水纸吸去多余的甘油,放在 已溶解的甘油胶上,盖上盖玻片,甘油 胶冻结后,将盖玻片四周的胶清除,并 用树胶将周围封起来,即成为半永久 性玻片标本。此片可保存几年。③永久 性装片的制作。选择合适的制片材料, 固定冲洗后,用合适的染色剂染色或 不进行染色,再经冲洗、脱水、透明等 步骤,最后用松节油或加拿大树胶封 藏。
运用整体制片法制片必须注意: 整体装片脱水时间要长,否则不容易 脱尽水分,在无水酒精中脱水后,最好 再经1:6石炭酸二甲苯,这样既能脱 尽水分,又能初步透明。如果用含水封 藏剂封藏,制作暂时性装片则无需经 过脱水及透明步骤。

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